1.Cell culture ແມ່ນຫຍັງ?
ວັດທະນະທໍາເຊນຫມາຍເຖິງການເອົາຈຸລັງອອກຈາກສັດຫຼືພືດແລະຫຼັງຈາກນັ້ນຂະຫຍາຍພວກມັນຢູ່ໃນສະພາບແວດລ້ອມທີ່ເອື້ອອໍານວຍ.ຈຸລັງສາມາດຖືກເອົາມາຈາກເນື້ອເຍື່ອໂດຍກົງແລະຖືກແຍກອອກໂດຍວິທີການ enzymatic ຫຼືກົນຈັກກ່ອນທີ່ຈະປູກຝັງ, ຫຼືພວກມັນສາມາດມາຈາກເສັ້ນຈຸລັງຫຼືເສັ້ນຈຸລັງທີ່ຖືກສ້າງຕັ້ງຂຶ້ນ.
2. ວັດທະນະທໍາຂັ້ນຕົ້ນແມ່ນຫຍັງ?
ວັດທະນະທໍາຂັ້ນຕົ້ນຫມາຍເຖິງຂັ້ນຕອນຂອງວັດທະນະທໍາຫຼັງຈາກຈຸລັງຖືກແຍກອອກຈາກເນື້ອເຍື່ອແລະຈະເລີນເຕີບໂຕພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂທີ່ເຫມາະສົມຈົນກ່ວາພວກມັນຄອບຄອງ substrates ທີ່ມີຢູ່ທັງຫມົດ (ນັ້ນແມ່ນ, ສາມາດບັນລຸ confluence).ໃນຂັ້ນຕອນນີ້, ຈຸລັງຕ້ອງໄດ້ຮັບການ subcultured ໂດຍການໂອນໃຫ້ເຂົາເຈົ້າເຂົ້າໄປໃນຖັງໃຫມ່ທີ່ມີຂະຫນາດກາງການຂະຫຍາຍຕົວສົດເພື່ອໃຫ້ພື້ນທີ່ເພີ່ມເຕີມສໍາລັບການສືບຕໍ່ການຂະຫຍາຍຕົວ.
2.1 ເສັ້ນເຊລ
ຫຼັງຈາກ subculture ທໍາອິດ, ວັດທະນະທໍາຕົ້ນຕໍແມ່ນເອີ້ນວ່າເສັ້ນຈຸລັງຫຼື subclone.ສາຍຈຸລັງທີ່ມາຈາກວັດທະນະທໍາຂັ້ນຕົ້ນແມ່ນມີອາຍຸຈໍາກັດ (ເຊັ່ນ: ພວກມັນຈໍາກັດ; ເບິ່ງຂ້າງລຸ່ມນີ້), ແລະເມື່ອພວກເຂົາຜ່ານໄປ, ຈຸລັງທີ່ມີຄວາມສາມາດເຕີບໂຕສູງສຸດໄດ້ຄອບງໍາ, ເຊິ່ງກໍ່ໃຫ້ເກີດລະດັບທີ່ແນ່ນອນຂອງ genotype ໃນປະຊາກອນທີ່ມີ phenotype.
2.2 ເຊນເຊລ
ຖ້າປະຊາກອນຍ່ອຍຂອງເສັ້ນຈຸລັງຖືກເລືອກໃນທາງບວກຈາກວັດທະນະທໍາໂດຍການໂຄນຫຼືວິທີການອື່ນໆ, ເສັ້ນຈຸລັງຈະກາຍເປັນສາຍພັນຂອງເຊນ.ເຊື້ອສາຍເຊລປົກກະຕິແລ້ວຈະໄດ້ຮັບການປ່ຽນແປງທາງພັນທຸກໍາເພີ່ມເຕີມຫຼັງຈາກສາຍຂອງພໍ່ແມ່ເລີ່ມຕົ້ນ.
3. ຈໍາກັດແລະສາຍເຊນຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງ
ຈຸລັງປົກກະຕິປົກກະຕິແລ້ວແບ່ງພຽງແຕ່ຈໍານວນຈໍາກັດຂອງເວລາກ່ອນທີ່ຈະສູນເສຍຄວາມສາມາດໃນການຂະຫຍາຍຕົວ.ນີ້ແມ່ນເຫດການທີ່ກໍານົດທາງພັນທຸກໍາທີ່ເອີ້ນວ່າ senescence;ເສັ້ນເຊລເຫຼົ່ານີ້ເອີ້ນວ່າເສັ້ນເຊລທີ່ຈໍາກັດ.ແນວໃດກໍ່ຕາມ, ບາງສາຍຈຸລັງກາຍເປັນອະມະຕະໂດຍຜ່ານຂະບວນການທີ່ເອີ້ນວ່າການຫັນປ່ຽນ, ເຊິ່ງສາມາດເກີດຂື້ນໂດຍທໍາມະຊາດຫຼືສາມາດຖືກກະຕຸ້ນໂດຍສານເຄມີຫຼືໄວຣັສ.ເມື່ອເສັ້ນຈຸລັງທີ່ມີຂອບເຂດຈໍາກັດຜ່ານການຫັນປ່ຽນແລະໄດ້ຮັບຄວາມສາມາດໃນການແບ່ງອອກຢ່າງບໍ່ມີກໍານົດ, ມັນຈະກາຍເປັນເສັ້ນຈຸລັງຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງ.
4.ສະພາບວັດທະນະທໍາ
ເງື່ອນໄຂວັດທະນະທໍາຂອງແຕ່ລະຈຸລັງແມ່ນແຕກຕ່າງກັນຫຼາຍ, ແຕ່ສະພາບແວດລ້ອມທຽມສໍາລັບການລ້ຽງຈຸລັງແມ່ນປະກອບດ້ວຍຖັງທີ່ເຫມາະສົມ, ເຊິ່ງປະກອບດ້ວຍສິ່ງຕໍ່ໄປນີ້:
4.1 Substrate ຫຼື culture medium ທີ່ໃຫ້ສານອາຫານທີ່ຈໍາເປັນ (ອາຊິດ amino, ຄາໂບໄຮເດດ, ວິຕາມິນ, ແຮ່ທາດ)
4.2 ປັດໄຈການຂະຫຍາຍຕົວ
4.3 ຮໍໂມນ
4.4 ອາຍແກັສ (O2, CO2)
4.5 ສະພາບແວດລ້ອມທາງກາຍະພາບ ແລະທາງເຄມີ (pH, ຄວາມກົດດັນ osmotic, ອຸນຫະພູມ)
ຈຸລັງສ່ວນຫຼາຍແມ່ນຂຶ້ນກັບການຍຶດຕິດກັບແລະຕ້ອງໄດ້ຮັບການປູກຝັງຢູ່ເທິງຊັ້ນໃຕ້ດິນແຂງຫຼືເຄິ່ງແຂງ (ວັດທະນະທໍາທີ່ຕິດຢູ່ຫຼື monolayer), ໃນຂະນະທີ່ຈຸລັງອື່ນໆສາມາດເຕີບໂຕແບບລອຍຢູ່ໃນຂະຫນາດກາງ (ວັດທະນະທໍາ suspension).
5.Cryopreservation
ຖ້າມີຈຸລັງເກີນຢູ່ໃນ subculture, ພວກມັນຄວນໄດ້ຮັບການປະຕິບັດດ້ວຍສານປ້ອງກັນທີ່ເຫມາະສົມ (ເຊັ່ນ DMSO ຫຼື glycerol) ແລະເກັບຮັກສາໄວ້ໃນອຸນຫະພູມຕ່ໍາກວ່າ -130 ° C (cryopreservation) ຈົນກ່ວາພວກເຂົາຕ້ອງການ.ສໍາລັບຂໍ້ມູນເພີ່ມເຕີມກ່ຽວກັບ subculture ແລະ cryopreservation ຂອງຈຸລັງ.
6.Morphology ຂອງຈຸລັງໃນວັດທະນະທໍາ
ຈຸລັງໃນວັດທະນະທໍາສາມາດແບ່ງອອກເປັນສາມປະເພດພື້ນຖານໂດຍອີງໃສ່ຮູບຮ່າງແລະລັກສະນະຂອງເຂົາເຈົ້າ (ເຊັ່ນ: morphology).
6.1 ຈຸລັງ Fibroblasts ແມ່ນ bipolar ຫຼື multipolar, ມີຮູບຮ່າງຍາວ, ແລະຈະເລີນເຕີບໂຕຕິດກັບ substrate.
6.2 ເຊລທີ່ຄ້າຍຄື epithelial ເປັນຮູບສີ່ຫຼ່ຽມມົນ, ມີຂະຫນາດປົກກະຕິກວ່າ, ແລະຖືກຕິດຢູ່ກັບ matrix ໃນແຜ່ນ discrete.
6.3 ຈຸລັງທີ່ຄ້າຍຄື Lymphoblast ແມ່ນເປັນຮູບຊົງກົມ ແລະປົກກະຕິແລ້ວຈະເລີນເຕີບໂຕຢູ່ໃນລະງັບໂດຍບໍ່ຕິດກັບພື້ນຜິວ.
7.ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກຂອງວັດທະນະທໍາເຊນ
ວັດທະນະທໍາຈຸລັງແມ່ນຫນຶ່ງໃນເຄື່ອງມືຕົ້ນຕໍທີ່ໃຊ້ໃນຊີວະວິທະຍາຂອງເຊນແລະໂມເລກຸນ.ມັນສະຫນອງລະບົບຕົວແບບທີ່ດີເລີດສໍາລັບການສຶກສາ physiology ແລະ biochemistry ປົກກະຕິຂອງຈຸລັງ (ເຊັ່ນ: ການຄົ້ນຄວ້າ metabolic, aging), ຜົນກະທົບຂອງຢາເສບຕິດແລະທາດປະສົມທີ່ເປັນພິດຕໍ່ຈຸລັງ, ແລະ mutagenesis ແລະ carcinogenic ຜົນກະທົບ.ມັນຍັງຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບການກວດກາແລະການພັດທະນາຢາແລະການຜະລິດຂະຫນາດໃຫຍ່ຂອງທາດປະສົມຊີວະພາບ (ເຊັ່ນ: ວັກຊີນ, ທາດໂປຼຕີນໃນການປິ່ນປົວ).ປະໂຫຍດຕົ້ນຕໍຂອງການນໍາໃຊ້ວັດທະນະທໍາຈຸລັງສໍາລັບຄໍາຮ້ອງສະຫມັກໃດໆເຫຼົ່ານີ້ແມ່ນຄວາມສອດຄ່ອງແລະການແຜ່ພັນຂອງຜົນໄດ້ຮັບທີ່ສາມາດໄດ້ຮັບໂດຍໃຊ້ batch ຂອງຈຸລັງ cloned.
ເວລາປະກາດ: 03-06-2019