ການປົນເປື້ອນຂອງຈຸລັງວັດທະນະທໍາໄດ້ຖືກຫຼຸດລົງຢ່າງມີປະສິດທິພາບ

ການປົນເປື້ອນຂອງຈຸລັງວັດທະນະທໍາໄດ້ຢ່າງງ່າຍດາຍສາມາດກາຍເປັນບັນຫາທົ່ວໄປທີ່ສຸດໃນຫ້ອງທົດລອງວັດທະນະທໍາຈຸລັງ, ບາງຄັ້ງກໍ່ເຮັດໃຫ້ເກີດຜົນສະທ້ອນທີ່ຮ້າຍແຮງຫຼາຍ.ການປົນເປື້ອນຂອງວັດທະນະທໍາຈຸລັງສາມາດແບ່ງອອກເປັນສອງປະເພດ, ການປົນເປື້ອນສານເຄມີເຊັ່ນ: ຂະຫນາດກາງ, serum ແລະ impurities ນ້ໍາ, endotoxins, plasticizers ແລະ detergents, ແລະການປົນເປື້ອນທາງຊີວະພາບເຊັ່ນ: ເຊື້ອແບັກທີເຣັຍ, molds, ເຊື້ອລາ, ເຊື້ອໄວຣັສ, mycoplasmas cross infections.ປົນເປື້ອນໂດຍສາຍຈຸລັງອື່ນໆ.ເຖິງແມ່ນວ່າມັນເປັນໄປບໍ່ໄດ້ທີ່ຈະກໍາຈັດການປົນເປື້ອນຢ່າງສົມບູນ, ແຕ່ຄວາມຖີ່ແລະຄວາມຮ້າຍແຮງຂອງມັນສາມາດຫຼຸດລົງໄດ້ໂດຍການເຂົ້າໃຈຢ່າງລະອຽດກ່ຽວກັບແຫຼ່ງຂອງມັນແລະປະຕິບັດຕາມເຕັກນິກການ aseptic ທີ່ດີ.

1.ພາກນີ້ອະທິບາຍເຖິງປະເພດຕົ້ນຕໍຂອງການປົນເປື້ອນທາງຊີວະພາບ:
ການປົນເປື້ອນເຊື້ອແບັກທີເຣັຍ
ການປົນເປື້ອນເຊື້ອໄວຣັດແລະເຊື້ອເຫັດ
ການປົນເປື້ອນ Mycoplasma
ການປົນເປື້ອນເຊື້ອລາ

1.1 ການປົນເປື້ອນເຊື້ອແບັກທີເຣັຍ
ເຊື້ອແບັກທີເຣັຍແມ່ນກຸ່ມຈຸລິນຊີທີ່ມີຈຸລັງດຽວຢູ່ທົ່ວທຸກແຫ່ງ.ປົກກະຕິແລ້ວພວກມັນມີເສັ້ນຜ່າສູນກາງບໍ່ພໍເທົ່າໃດໄມຄຣອນ ແລະສາມາດມາໃນຫຼາຍຮູບຊົງ, ຈາກຮູບຊົງກົມໄປຫາເຊືອກ ແລະກ້ຽວວຽນ.ເນື່ອງຈາກການແຜ່ກະຈາຍ, ຂະຫນາດ, ແລະອັດຕາການຂະຫຍາຍຕົວຢ່າງໄວວາ, ເຊື້ອແບັກທີເຣັຍ, ພ້ອມກັບເຊື້ອລາແລະແມ່ພິມ, ແມ່ນການປົນເປື້ອນທາງຊີວະພາບທົ່ວໄປທີ່ສຸດໃນວັດທະນະທໍາຈຸລັງ.

1.1.1 ການກວດຫາການປົນເປື້ອນຂອງແບັກທີເລຍ
ການປົນເປື້ອນເຊື້ອແບັກທີເຣັຍໄດ້ຖືກກວດພົບໄດ້ງ່າຍໂດຍການກວດກາສາຍຕາຂອງວັດທະນະທໍາພາຍໃນສອງສາມມື້ທີ່ມັນຕິດເຊື້ອ;
ວັດທະນະທໍາທີ່ຕິດເຊື້ອມັກຈະມີເມກ (ເຊັ່ນ, ຂີ້ເທົ່າ), ບາງຄັ້ງມີຮູບເງົາບາງໆຢູ່ດ້ານ.
ການຫຼຸດລົງຢ່າງກະທັນຫັນໃນ pH ຂອງສື່ວັດທະນະທໍາແມ່ນຍັງພົບເລື້ອຍໆ.
ພາຍໃຕ້ກ້ອງຈຸລະທັດທີ່ມີພະລັງງານຕໍ່າ, ເຊື້ອແບັກທີເຣັຍປະກົດວ່າເປັນເມັດນ້ອຍໆ, ເຄື່ອນຍ້າຍລະຫວ່າງຈຸລັງ, ແລະການສັງເກດພາຍໃຕ້ກ້ອງຈຸລະທັດພະລັງງານສູງສາມາດແກ້ໄຂຮູບຮ່າງຂອງເຊື້ອແບັກທີເຣັຍແຕ່ລະຄົນ.

1.2 ການປົນເປື້ອນຂອງແມ່ພິມ ແລະໄວຣັສ
1.2.1 ການປົນເປື້ອນແມ່ພິມ
ແມ່ພິມແມ່ນຈຸລິນຊີ eukaryotic ຂອງອານາຈັກ fungal ທີ່ຈະເລີນເຕີບໂຕໃນຮູບແບບຂອງ filaments multicellular ເອີ້ນວ່າ hyphae.ເຄືອ​ຂ່າຍ​ເຊື່ອມ​ຕໍ່​ຂອງ filaments multicellular ເຫຼົ່າ​ນີ້​ມີ nuclei ທີ່​ຄ້າຍ​ຄື​ກັນ​ທາງ​ພັນ​ທຸ​ກໍາ​ທີ່​ເອີ້ນ​ວ່າ colonies ຫຼື mycelium​.

ຄ້າຍຄືກັບການປົນເປື້ອນຂອງເຊື້ອລາ, pH ຂອງວັດທະນະທໍາຍັງຄົງຄົງທີ່ໃນໄລຍະເບື້ອງຕົ້ນຂອງການປົນເປື້ອນແລະຫຼັງຈາກນັ້ນເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງໄວວາຍ້ອນວ່າວັດທະນະທໍາຕິດເຊື້ອຮ້າຍແຮງຂຶ້ນແລະກາຍເປັນເມຄ.ພາຍໃຕ້ກ້ອງຈຸລະທັດ, mycelium ປົກກະຕິແລ້ວແມ່ນ filamentous, ບາງຄັ້ງເປັນກຸ່ມທີ່ຫນາແຫນ້ນຂອງ spores.spores ຂອງ molds ຫຼາຍສາມາດຢູ່ລອດໃນສະພາບແວດລ້ອມທີ່ຮຸນແຮງແລະ inhospitable ທີ່ສຸດໃນໄລຍະ dormant ຂອງເຂົາເຈົ້າແລະຖືກກະຕຸ້ນພຽງແຕ່ໃນເວລາທີ່ພົບເງື່ອນໄຂການຂະຫຍາຍຕົວທີ່ເຫມາະສົມ.

1.2.2 ການຕິດເຊື້ອໄວຣັສ
ໄວຣັສແມ່ນຕົວແທນຕິດເຊື້ອກ້ອງຈຸລະທັດທີ່ຍຶດເອົາເຄື່ອງຈັກຂອງເຊນເຈົ້າພາບເພື່ອສືບພັນ.ຂະຫນາດນ້ອຍທີ່ສຸດຂອງພວກເຂົາເຮັດໃຫ້ພວກເຂົາຍາກທີ່ຈະກວດພົບໃນວັດທະນະທໍາແລະເອົາອອກຈາກ reagents ທີ່ໃຊ້ໃນຫ້ອງທົດລອງວັດທະນະທໍາເຊນ.ເນື່ອງຈາກໄວຣັສສ່ວນໃຫຍ່ມີຄວາມຕ້ອງການທີ່ເຂັ້ມງວດຫຼາຍສໍາລັບເຈົ້າພາບຂອງພວກເຂົາ, ພວກມັນມັກຈະບໍ່ມີຜົນກະທົບທາງລົບຕໍ່ວັດທະນະທໍາຈຸລັງຂອງຊະນິດອື່ນນອກເຫນືອຈາກເຈົ້າພາບ.
ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ການນໍາໃຊ້ວັດທະນະທໍາຈຸລັງທີ່ຕິດເຊື້ອໄວຣັດສາມາດເຮັດໃຫ້ເກີດຄວາມສ່ຽງທີ່ຮ້າຍແຮງຕໍ່ສຸຂະພາບຂອງພະນັກງານຫ້ອງທົດລອງ, ໂດຍສະເພາະຖ້າຈຸລັງຂອງມະນຸດຫຼື primate ໄດ້ຖືກປູກຢູ່ໃນຫ້ອງທົດລອງ.

ການຕິດເຊື້ອໄວຣັດໃນວັດທະນະທໍາເຊນສາມາດກວດພົບໄດ້ໂດຍກ້ອງຈຸລະທັດອີເລັກໂທຣນິກ, ການສ້າງພູມຕ້ານທານກັບຊຸດຂອງພູມຕ້ານທານ, ELISA, ຫຼື PCR ດ້ວຍ primers ໄວຣັສທີ່ເຫມາະສົມ.

1.3 ການປົນເປື້ອນ Mycoplasma
Mycoplasmas ແມ່ນເຊື້ອແບັກທີເຣັຍທີ່ງ່າຍດາຍທີ່ບໍ່ມີຝາຂອງເຊນ, ແລະພວກມັນຖືກຄິດວ່າເປັນສິ່ງມີຊີວິດທີ່ເຮັດແບບຈໍາລອງດ້ວຍຕົນເອງທີ່ນ້ອຍທີ່ສຸດ.ເນື່ອງຈາກຂະຫນາດຂະຫນາດນ້ອຍທີ່ສຸດຂອງພວກເຂົາ (ປົກກະຕິແລ້ວຫນ້ອຍກວ່າ 1 micron), mycoplasma ແມ່ນຍາກທີ່ຈະກວດພົບຈົນກ່ວາພວກມັນມີຄວາມຫນາແຫນ້ນສູງທີ່ສຸດແລະເຮັດໃຫ້ວັດທະນະທໍາຂອງເຊນຊຸດໂຊມລົງ;ຈົນກ່ວານັ້ນ, ປົກກະຕິແລ້ວບໍ່ມີສັນຍານທີ່ຊັດເຈນຂອງການຕິດເຊື້ອ.

1.3.1 ການກວດຫາການປົນເປື້ອນຂອງ mycoplasma
ບາງ mycoplasmas ການຂະຫຍາຍຕົວຊ້າອາດຈະຍັງຄົງຢູ່ໃນວັດທະນະທໍາໂດຍບໍ່ມີການເຮັດໃຫ້ເກີດການເສຍຊີວິດຂອງເຊນ, ແຕ່ພວກມັນປ່ຽນແປງພຶດຕິກໍາແລະການເຜົາຜະຫລານຂອງຈຸລັງເຈົ້າພາບໃນວັດທະນະທໍາ.

ການຕິດເຊື້ອ mycoplasma ຊໍາເຮື້ອອາດຈະມີລັກສະນະໂດຍການຫຼຸດຜ່ອນອັດຕາການຂະຫຍາຍຈຸລັງ, ຄວາມຫນາແຫນ້ນຂອງຄວາມອີ່ມຕົວຫຼຸດລົງແລະການລວມຕົວໃນວັດທະນະທໍາ suspension.
ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ວິທີດຽວທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້ໃນການກວດສອບການປົນເປື້ອນຂອງ mycoplasma ແມ່ນການທົດສອບວັດທະນະທໍາເປັນປະຈໍາໂດຍນໍາໃຊ້ fluorescent staining (ຕົວຢ່າງ, Hoechst 33258), ELISA, PCR, immunostaining, autoradiography, ຫຼືການທົດສອບ microbial.

1.4 ການປົນເປື້ອນຂອງເຊື້ອລາ
ເຊື້ອລາແມ່ນ eukaryotes ຈຸລັງດຽວຂອງອານາຈັກເຊື້ອເຫັດ, ມີຂະຫນາດຕັ້ງແຕ່ສອງສາມໄມຄອນ (ປົກກະຕິ) ເຖິງ 40 ໄມຄຣອນ (ບໍ່ຄ່ອຍ).

1.4.1 ການກວດຫາການປົນເປື້ອນຂອງເຊື້ອລາ
ເຊັ່ນດຽວກັນກັບການປົນເປື້ອນເຊື້ອແບັກທີເລຍ, ວັດທະນະທໍາທີ່ປົນເປື້ອນເຊື້ອລາສາມາດກາຍເປັນເມຄ, ໂດຍສະເພາະຖ້າການປົນເປື້ອນຢູ່ໃນຂັ້ນຕອນທີ່ກ້າວຫນ້າ.pH ຂອງວັດທະນະທໍາທີ່ປົນເປື້ອນເຊື້ອລາມີການປ່ຽນແປງເລັກນ້ອຍຈົນກ່ວາການປົນເປື້ອນຈະຮ້າຍແຮງຂຶ້ນ, ໃນຂັ້ນຕອນນັ້ນ pH ມັກຈະເພີ່ມຂຶ້ນ.ພາຍໃຕ້ກ້ອງຈຸລະທັດ, ເຊື້ອລາຈະປາກົດເປັນຮູບໄຂ່ ຫຼືຮູບຊົງກົມ ແລະອາດຜະລິດອະນຸພາກຂະຫນາດນ້ອຍກວ່າ.

2.ການຕິດເຊື້ອຂ້າມ
ເຖິງແມ່ນວ່າບໍ່ທໍາມະດາກັບການປົນເປື້ອນຂອງຈຸລິນຊີ, ການປົນເປື້ອນຂ້າມຂອງເຊນຫຼາຍສາຍທີ່ມີ HeLa ແລະສາຍຈຸລັງທີ່ເຕີບໂຕໄວອື່ນໆແມ່ນເປັນບັນຫາທີ່ຖືກກໍານົດຢ່າງຈະແຈ້ງທີ່ມີຜົນສະທ້ອນທີ່ຮ້າຍແຮງ.ໄດ້ຮັບສາຍເຊນຈາກທະນາຄານໂທລະສັບມືຖືທີ່ມີຊື່ສຽງ, ກວດເບິ່ງຄຸນລັກສະນະຂອງສາຍເຊນຢ່າງເປັນປົກກະຕິ, ແລະນໍາໃຊ້ເຕັກນິກການຕິດເຊື້ອທີ່ດີ.ການປະຕິບັດເຫຼົ່ານີ້ຈະຊ່ວຍໃຫ້ທ່ານຫຼີກເວັ້ນການປົນເປື້ອນຂ້າມ.DNA fingerprinting, karyotyping ແລະ isotyping ສາມາດຢືນຢັນວ່າມີການປົນເປື້ອນຂ້າມໃນວັດທະນະທໍາເຊນຂອງທ່ານ.

ເຖິງແມ່ນວ່າບໍ່ທໍາມະດາກັບການປົນເປື້ອນຂອງຈຸລິນຊີ, ການປົນເປື້ອນຂ້າມຂອງເຊນຫຼາຍສາຍທີ່ມີ HeLa ແລະສາຍຈຸລັງທີ່ເຕີບໂຕໄວອື່ນໆແມ່ນເປັນບັນຫາທີ່ຖືກກໍານົດຢ່າງຈະແຈ້ງທີ່ມີຜົນສະທ້ອນທີ່ຮ້າຍແຮງ.ໄດ້ຮັບສາຍເຊນຈາກທະນາຄານໂທລະສັບມືຖືທີ່ມີຊື່ສຽງ, ກວດເບິ່ງຄຸນລັກສະນະຂອງສາຍເຊນຢ່າງເປັນປົກກະຕິ, ແລະນໍາໃຊ້ເຕັກນິກການຕິດເຊື້ອທີ່ດີ.ການປະຕິບັດເຫຼົ່ານີ້ຈະຊ່ວຍໃຫ້ທ່ານຫຼີກເວັ້ນການປົນເປື້ອນຂ້າມ.DNA fingerprinting, karyotyping ແລະ isotyping ສາມາດຢືນຢັນວ່າມີການປົນເປື້ອນຂ້າມໃນວັດທະນະທໍາເຊນຂອງທ່ານ.